江苏吉泰肽业科技有限公司
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很多化学反应和方法被开发来合成多肽链,经典的方法有:液相多肽合成(LPPS),反应在溶液中进行,使用被保护的氨基酸,每一次偶联和去保护后需要从溶液中分离。
固相多肽合成(SPPS)在不能溶解的聚脂上合成多肽链,从而简化了合成过程。每一次去保护后被保护的氨基酸被一个一个的添加到树脂上不需要中间的分离步骤。在树脂上合成了需要的长度后,将多肽切割下来并通过色谱层析纯化。对于生产特定的多肽也有可能混合使用液相合成和固相合成这两种方法。
显而易见的是,对于高纯度药物应用短链多肽(<15个氨基酸)用液相合成更经济,所以通常用液相多肽合成的方法大规模的合成这种多肽。尽管液相多肽合成需要很多步骤,液相比固相多肽合成技术能够更经济的生产产品规模比较大的多肽。然而由于工艺的复杂性,液相合成并不是长肽的可行性选择。
在过去十年,固相合成成为大多数多肽的首选。有两种方法:Boc法和Fmoc法,后者由于其工艺简单以及可避免氟化氢的毒害而越来越流行。
在多肽合成中运用正交保护基团为固相多肽合成技术开发了合成复杂多肽的新方法。固相多肽合成可以使用不同类型的聚苯乙烯基料树脂,最常用的是Wang树脂、氯代二苯基甲烷(2-Chlorotrityl chloride)、Rink amide树脂和菲尔德树脂。Fmoc-保护氨基酸广泛应用于商业合成。
可以结合固相合成和液相合成的方法合成长的复杂的多肽。例如,通过液相合成合成一些短的片段,然后将它们连接到固相树脂上形成更长的肽。另外一种情况则是,多肽片段可以在固相树脂上合成,然后从树脂上切割下被保护的多肽片段,最后在液相中连接各个受保护片段。