江苏吉泰肽业科技有限公司
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多肽是什么
肽是由各种氨基酸分子之间经脱水形成肽键相连的聚合型有机化合物。与高分子聚合物不同,作为肽链基本构建的单体(monomer)是各种氨基酸残基,它们的侧链结构各不相同。因此肽不是高分子聚合物。与蛋白质相比,肽的共价键形成的链结构与前者相同,但链长度及分子量远远小于前者。因此,肽不是蛋白质。尽管如此,肽与蛋白质之间还是存在许多相近的理化性质,如亲水性、极性、二级结构、易酶解、金属络合性等。从分子量大小上很难在某个准确的数值上把肽与蛋白质区别开。至今人们习惯地按肽链长短进行如下的表示:
小于10个残基为寡肽(oligopeptide)或小肽分子。10~80(或100)个残基为多肽(polypeptide)或肽。大于80(或100)个残基为蛋白质,也有人主张只有在150个或200个残基以上的分子才是真正的蛋白质。
按条件溶解多肽
若多肽不溶于纯水,超声处理有助于打碎颗粒并增加溶解度。注意:超声处理会引起溶液发热和多肽降解。
若多肽中包含多个碱性氨基酸,使用1~10%的乙酸水溶液;对于疏水性非常强的多肽,则使用50%乙酸。
若多肽中含有大量酸性氨基酸,可用1~10%氨溶液或乙酸乙基吗啡或重碳酸盐等挥发性的碱性缓冲液溶解。pH值在层析前必须调整。
异丙醇和乙腈能溶解中等大小的肽。若肽要上柱,有机溶剂的量则必须很少,否则将严重影响滞留时间。
若多肽合成因为含有Val、Leu、Met、Phe、Tyr、Ala等芳烃侧链而高度疏水,或为中性肽时,DMF或DMSO等膜变性剂的使用,有助于多肽的溶解。
a. 高浓度膜变性剂通过破坏多肽的二级结构而助溶。
b. 膜变性剂适于多肽分析液的制备,但可能会对其生物活性的研究工作造成干扰。
c. DMF是最佳变性剂(最高浓度可达30%),滴加至多肽溶解。
d. 反相层析时,DMF将与洗脱液前峰一起流出,依进样量的多少,峰值可能很高。大多数肽能在大量DMF流出后几分钟内流出,若肽链很小,洗脱太早,多肽的量将降低。
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